Биотехнология
Категория реферата: Рефераты по биологии
Теги реферата: сочинение евгений онегин, соціологія шпори
Добавил(а) на сайт: Davyd.
Предыдущая страница реферата | 1 2 3 4 | Следующая страница реферата
БИОТЕХНОЛОГИЯ НА СЛУЖБЕ НАРОДНОГО ХОЗЯЙСТВА, ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И НАУКИ
Биотехнологические разработки могут внести немаловажный вклад в решение
комплексных проблем народного хозяйства, здравоохранения и науки.
Для удовлетворения пищевых потребностей необходимо увеличить эффективность
растениеводства и животноводства. Именно на это, в первую очередь, нацелены
усилия биотехнологов. Кроме того, биотехнология предлагает как источник
кормового (возможно, и пищевого) белка клеточную массу бактерий, грибов и
водорослей.
Во-вторых, повышение цен на традиционные источники энергии (нефть, природный газ, уголь) и угроза исчерпания их запасов побудили человечество
обратиться к альтернативным путям получения энергии. Биотехнология может
дать ценные возобновляемые энергетические источники: спирты, биогенные
углеводороды, водород. Эти экологически чистые виды топлива можно получать
путем биоконверсии отходов промышленного и сельскохозяйственного
производства.
В-третьих, уже в наши дни биотехнология оказывает реальную помощь
здравоохранению. Нет сомнений в терапевтической ценности инсулина, гормона
роста, интерферонов, факторов свертывания крови и иммунной системы, тромболитических ферментов, изготовленных биотехнологическим путем. Помимо
получе ния лечебных средств, биотехнология позволяет проводить раннюю
диагностику инфекционных заболеваний и злокачественных новообразований на
основе применения препаратов антигенов, моноклональных антител, ДНК/РНК-
проб. С помощью новых вакцинных препаратов возможно предупреждение
инфекционных болезней.
В-четвертых, биотехнология может резко ограничить масштабы загрязнения
нашей планеты промышленными, сельскохозяйственными и бытовыми отходами, токсичными компонентами автомобильных выхлопов и т. д. Современные
разработки нацелены
на создание безотходных технологий, на получение легко разрушаемых
полимеров (в частности, биогенного происхождения: поли-?-оксибутирата, полиамилозы) и поиск новых активных микроорганизмов-разрушителей полимеров
(полиэтилена, полипропилена, полихлорвинила). Усилия биотехнологов
направлены также на борьбу с пестицидными загрязнениями — следствием
неумеренного и нерационального применения ядохимикатов.
Биотехнологические разработки играют важную роль в добыче и переработке
полезных ископаемых, получении различных препаратов и создании новой
аппаратуры для аналитических целей.
1. Биотехнология и сельское хозяйство
Биотехнология и растениеводство
Культурные растения страдают от сорняков, грызунов, насекомых-вредителей, нематод, фитопатогенных грибов, бактерий, вирусов, неблагоприятных погодных
и климатических условий. Перечисленные факторы наряду с почвенной эрозией и
градом значительно снижают урожайность сельскохозяйственных растений.
Известно, какие разрушительные последствия в картофелеводстве вызывает
колорадский жук, а также гриб Phytophtora — возбудитель ранней гнили
(фитофтороза) картофеля. Кукуруза подвержена опустошительным «набегам»
южной листовой гнили, ущерб от которой в США в 1970 г. был оценен в 1 млрд.
долларов.
В последние годы большое внимание уделяют вирусным заболеваниям растений.
Наряду с болезнями, оставляющими видимые следы на культурных растениях
(мозаичная болезнь табака и хлопчатника, зимняя болезнь томатов), вирусы
вызывают скрытые инфекционные процессы, значительно снижающие урожайность
сельскохозяйственных культур и ведущие к их вырождению.
Биотехнологические пути защиты растений от рассмотренных вредоносных
агентов включают: 1) выведение сортов растений, устойчивых к
неблагоприятным факторам; 2) химические средства борьбы (пестициды) с
сорняками (гербициды), грызунами (ратициды), насекомыми (инсектициды), нематодами (нематоциды), фитопатогенными грибами (фунгициды), бактериями, вирусами; 3) биологические средства борьбы с вредителями, использование их
естественных врагов и паразитов, а также токсических продуктов, образуемых
живыми организмами.
Наряду с защитой растений ставится задача повышения продуктивности
сельскохозяйственных культур, их пищевой (кормовой) ценности, задача
создания сортов растений, растущих на засоленных почвах, в засушливых и
заболоченных районах. Разработки нацелены на повышение энергетической
эффективности различных процессов в растительных тканях, начиная от
поглощения кванта света и кончая ассимиляцией СО2 и водно-солевым обменом.
Выведение новых сортов растений. Традиционные подходы к выведению новых
сортов растений — это селекция на основе гибридизации, спонтанных и
индуцированных мутаций. Методы селекции не столь отдаленного будущего
включают генетическую и клеточную инженерию.
Генетическую инженерию предлагают использовать для выведения
азотфиксирующих растений. В природных условиях азотфиксирующие клубеньковые
бактерии, представители рода Rhizobium, вступают в симбиоз с бобовыми.
Комплекс генов азотфиксации (nif) из этих или иных бактерий предлагают
включить в геном злаковых культур. Трудности связаны с поиском подходящего
вектора, поскольку широко используемые для подобных целей Agrobacterium с
плазмидами Ti и Ri не заселяют злаки. Планируют модификацию генома
Agrobacterium, чтобы бактерия могла вступать в симбиоз со злаками и
передавать им генетическую информацию. Другим решением проблемы могла бы
быть трансформация растительных протопластов посредством ДНК. К компетенции
клеточной инженерии относят создание новых азотфиксирующих симбиотических
ассоциаций «растение — микроорганизм».
В настоящее время выделены и клонированы гены sym, отвечающие за
установление симбиотических отношений между клубеньковыми азотфиксаторами и
растением-хозяином. Путем переноса этих генов в свободноживущие
азотфиксирующие бактерии (Klebsiella, Azotobacter) представляется возможным
заставить их вступить в симбиоз с ценными сельскохозяйственными культурами.
Методами генетической инженерии предполагают также повысить уровень
обогащения почвы азотом, амплифици-руя гены азотфиксации у Klebsiella и
Azotobacter.
Разрабатываются подходы к межвидовому переносу генов asm, обусловливающих
устойчивость растений к нехватке влаги, жаре, холоду, засоленности почвы.
Перспективы повышения эффективности биоконверсии энергии света связаны с
модификацией генов, отвечающих за световые и темновые стадии этого
процесса, в первую очередь генов cfx, регулирующих фиксацию СО2 растением.
В этой связи представляют большой интерес
разработки по межвидовому переносу генов, кодирующих хлорофилл а/b-
связывающий белок и малую субъединицу рибулозо-бис-фосфаткарбоксилазы —
ключевого фермента в фотосинтетической фиксации СО2.
Гены устойчивости к некоторым гербицидам, выделенные из бактерий и дрожжей, были успешно перенесены в растения табака. Разведение устойчивых к
гербицидам растений открывает возможность их применения для уничтожения
сорняков непосредственно на угодьях, занятых сельскохозяйственными
культурами. Проблема состоит, однако, в том, что массивные дозы гербицидов
могут оказаться вредными для природных экосистем.
Некоторые культурные растения сильно страдают от нематод. Обсуждается
проект введения в растения новых генов, обусловливающих биосинтез и
выделение нематоцидов корневыми клетками. Важно, чтобы эти нематоциды не
проявляли токсичности по отношению к полезной прикорневой микрофлоре.
Возможно также создание почвенных ассоциаций «растение — бактерия» или
«растение — гриб (микориза)» так, чтобы бактериальный (грибной) компонент
ассоциации отвечал за выделение нематоцидов.
Важное место в выведении новых сортов растений занимает метод
культивирования растительных клеток in vitro. Регенерируемая из таких
клеток «молодая поросль» состоит из идентичных по генофонду экземпляров, сохраняющих ценные качества избранного клеточного клона. В Австралии из
культивируемых in vitro клеточных клонов выращивают красные камедные
деревья (австралийские эвкалипты), отличающиеся способностью расти на
засоленных почвах. Предполагается, что корни этих растений будут выкачивать
воду из таких почв и тем самым понижать уровень грунтовых вод. Это приведет
к снижению засоленности поверхностных слоев почвы в результате переноса
минеральных солей в более глубокие слои с потоками дождевой воды. В
Малайзии из клеточного клона получена масличная пальма с повышенной
устойчивостью к фитопатогенам и увеличенной способностью к образованию
масла (прирост на 20—30%). Клонирование клеток с последующим их скринингом
и регенерацией растений из отобранных клонов рассматривают как важный метод
сохранения и улучшения древесных пород умеренных широт, в частности хвойных
деревьев. Растения-регенеранты, выращенные из клеток или тканей меристемы, используют ныне для разведения спаржи, земляники, брюссельской и цветной
капусты, гвоздик, папоротников, персиков, ананасов, бананов.
С клонированием клеток связывают надежды на устранение вирусных заболеваний
растений. Разработаны методы, позволяющие получать регенеранты из тканей
верхушечных почек растений. В дальнейшем среди регенерированных растений
проводят отбор особей, выращенных из незараженных клеток, и выбраковку
больных растений. Раннее выявление вирусного заболевания, необходимое для
подобной выбраковки, может быть осуществлено методами иммунодиагностики, с
использованием моноклональных антител или методом ДНК/РНК-проб.
Предпосылкой для этого является получение очищенных препаратов
соответствующих вирусов или их структурных компонентов.
Клонирование клеток — перспективный метод получения не только новых сортов, но и промышленно важных продуктов. При правильном подборе условий
культивирования, в частности при оптимальном соотношении фитогормонов, изолированные клетки более продуктивны, чем целые растения. Иммобилизация
растительных клеток или протопластов нередко ведет к повышению их
синтетической активности. Табл. 6 включает биотехнологические процессы с
использованием культур растительных клеток, наиболее перспективные для
промышленного внедрения.
Коммерческое значение в основном имеет промышленное производство шиконина.
Применение растительных клеток, которые являются высокоэффективными
продуцентами алкалоидов, терпенов, различных пигментов и масел, пищевых
ароматических добавок (земляничной, виноградной, ванильной, томатной, сельдерейной, спаржевой) наталкивается на определенные трудности, связанные
с дороговизной используемых технологий, низким выходом целевых продуктов, длительностью производственного процесса.
Таким образом, биотехнология открывает широкие перспективы в области
выведения новых сортов растений, устойчивых к неблагоприятным внешним
воздействиям, вредителям, патогенам, не требующих азотных удобрений, отличающихся высокой продуктивностью.
Таблица 1. Примеры клеточных культур — высокоэффективных продуцентов
ценных соединений (по О. Sahai, M. Knuth, 1985. К. Hahlbrock. 1986)
|Вид растения |Целевой продукт |Предполагаемое применение |
|Lithospermum |Шиконин и его |Красный пигмент, |
|erithrorhizon |производные |используемый в косметике |
|(воробейник) | |как «биологическая губная|
| | |помада», |
| | |антибактериальный агент, |
| | |используемый при лечении|
| | |ран, ожогов, геморроя |
|Nicotiana tabacum |Убихинон- 10 |Важный компонент |
|(табак) | |дыхательной и |
| | |фотосинтетической цепей |
| | |переноса электронов, |
| | |применяемый как витамин и |
| | |в аналитических целях |
|To же |Глутатион |Участник многих |
| | |окислительно-восстановитель|
| | |ных реакций в клетке, |
| | |приравнивается к витамину |
|Morinda citrifolia |Антрахиноны |Сырье для лакокрасочной |
| | |промышленности |
|Coleus blumei |Розмариновая |Жаропонижающее средство, |
| |кислота |проходящее клинические |
| | |испытания |
|Berberis stolonifera |Ятрорризин |Спазмолитическое |
|(барбарис) | |лекарственное средство |
Биодеградация пестицидов. Пестициды обладают мощным, но недостаточно
избирательным действием. Так, гербициды, смываясь дождевыми потоками или
почвенными водами на посевные площади, наносят ущерб сельскохозяйственным
культурам. Помимо этого, некоторые пестициды длительно сохраняются в почве, что тоже приводит к потерям урожая. Возможны разные подходы к решению
проблемы: 1) усовершенствование технологии применения пестицидов, что не
входит в компетенцию биотехнологии; 2) выведение растений, устойчивых к
пестицидам; биодеградация пестицидов в почве.
К разрушению многих пестицидов способна микрофлора почвы. Методами
генетической инженерии сконструированы штаммы микроорганизмов с повышенной
эффективностью биодеградации ядохимикатов, в частности штамм Pseudomonas
ceparia, разрушающий 2, 4, 5-трихлорфеноксиацетат. Устойчивость того или
иного пестицида в почве меняется при добавлении его в сочетании с другим
пестицидом. Так, устойчивость гербицида хлорпро-фама увеличивается при его
внесении совместно с инсектицидами из группы метилкарбаматов. Оказалось, что метилкарбаматы ингибируют микробные ферменты, катализирующие гидролиз
хлорпрофама.
Микробная трансформация пестицидов имеет и оборотную сторону. Во-первых, быстрая деградация пестицидов сводит на нет их полезный эффект. Во-вторых, в результате микробного превращения могут образоваться продукты, сильно
ядовитые для растений. При использовании гербицида тиобенкарба в Японии
наблюдали подавление роста и развития риса. Установлено, что подавляет не
сам гербицид, а его дехлорированное производное S-бензил-N,N-
диэтилтиокарбамат. Чтобы предотвратить образование такого производного, тиобенкарб применяют в комбинации с метоксифеном, ингибитором
дехлорирующего фермента микроорганизмов.
Биологическая защита растений от вредителей и патогенов. Из широкого
спектра биологических средств защиты растений ограничимся рассмотрением
средств борьбы с насекомыми-вредителями и патогенными микроорганизмами.
Именно в этих областях имеются наибольшие перспективы.
К традиционным биологическим средствам, направленным против насекомых, принадлежат хищные насекомые. В последние годы арсенал «оружия»
инсектицидного действия пополнен грибами, бактериями, вирусами, патогенными
для насекомых (энтомо-патогенными). Многие виды насекомых-вредителей (тля, колорадский жук, яблоневая плодожорка, озимая совка и др.) восприимчивы к
заболеванию, вызываемому грибом Beauveria bussiana. Препарат боверин из
лиофильно высушенных конидий гриба сохраняет энтомопатогенность в течение
года после обработки почвы или растений. Препарат пецилолин из гриба
Poecilomyces fumoso-roseus применяют для борьбы с вредителями кустарников, например смородины.
Важным источником бактериальных энтомопатогенных препаратов служит Bacillus
thuringiensis. Эти препараты обладают высокой устойчивостью и патогенны для
нескольких сотен видов насекомых-вредителей, в том числе для листогрызущих
насекомых — вредителей яблонь, винограда, капусты, лесных деревьев. Гены, отвечающие за синтез одного из токсинов В. thuringiensis, были изолированы
и перенесены в растения табака. Необходимо, чтобы такие «энтомопатогенные»
растения не содержали веществ, токсичных для человека и животных.
Вирусные препараты отличаются высокой специфичностью действия, длительным
(до 10—15 лет) сохранением активности, устойчивостью к колебаниям
температуры и влажности. Из многих сотен известных энтомопатогенных вирусов
наибольшее применение находят вирусы ядерного полиэдроза, обладающие
высокой эффективностью действия на насекомых-вредителей. Насекомых
выращивают в искусственных условиях, заражают вирусом, из гомогенатов
погибших насекомых готовят препараты. Применяют отечественные препараты
вирин-ЭКС (против капустной совки), вирин-ЭНШ (против непарного
шелкопряда). В последние годы для культивирования вирусов широко применяю;
культуры клеток насекомых.
Комбинация из нескольких биологических средств нередко действует
на вредителей более эффективно, чем каждый в от дельности. Смертность
соснового шелкопряда резко возрастает, если вирус цитоплазматического
полиэдроза применяют в сочетании с препаратами из Вас. thuringiensis.
Эффективна комбинация биологических и химических средств защиты
растений от насекомых.
Среди новых средств защиты растений — вещества биогенного происхождения, ингибирующие откладку яиц насекомыми или стимулирующие активность
естественных врагов насекомых вредителей: хищников, паразитов .
Разнообразны средства защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов.
1. Антибиотики. Примерами могут служить триходермин и трихотецин, продуцируемые грибами Trichoderma sp. и Trichotecium roseum. Эти
антибиотики используются для борьбы с корневыми гнилями овощных, зерновых и
технических культур.
2. Фитоалексины, естественные растительные агенты, инактивирующие
микробных возбудителей заболеваний. Эти соединения, синтезируемые в тканях растений в ответ на внедрение фитопатогенов, могут служить высокоспецифичными замените-
лями пестицидов. Фитоалексин перца успешно применяли при фитофторозе. Могут
быть использованы также вещества, стимулирующие синтез фитоалексинов в
растительных тканях.
3. Использование микробов-антагонистов, вытесняющих патогенный вид и
подавляющих его развитие.
4. Иммунизация и вакцинация растений. Вакцинные препараты стремятся вводить
непосредственно в прорастающие семена.
5. Введение в ткани растений специфичного агента (d-фактора), снижающего
жизнеспособность возбудителя.
Биологические средства — важная составная часть комплексной программы
защиты растений. Эта программа предусматривает проведение защитных
мероприятий агротехнического, биологического и химического плана наряду с
использованием устойчивых сортов растений. Задачей комплексной программы
является поддержание численности вредителей растений на экологически
сбалансированном уровне, не наносящем ощутимого вреда культурным растениям.
Биологические удобрения. Биологические (бактериальные) удобрения применяют
для обогащения почвы связанным азотом. Большое распространение получили
препараты нитрагин и азотобактерин — клетки клубеньковых бактерий и
азотобактера, к которым добавляют стабилизаторы (мелассу, тиомочевину) и
наполнитель (бентонит, почву). Азотобактерин обогащает почву не только
азотом, но и витаминами и фитогормонами, гиббереллинами и гетероауксинами.
Препарат фосфо-бактерин из Bacillus megaterium превращает сложные
органические соединения фосфора в простые, легко усвояемые растениями.
Фосфобактерин также обогащает почву витаминами и улучшает азотное питание
растений.
Растения синтезируют ряд соединений, регулирующих их рост и развитие
(фитогормоны, биорегуляторы). К их числу принадлежат ауксины, гиббереллины, цитокинины. Созревание плодов стимулирует этилен. Эти биорегуляторы находят
применение в сельском хозяйстве. К числу новых, обнаруженных в последние
годы биорегуляторов относят пептиды, имеются перспективы их применения в
сельском хозяйстве.
Биотехнология и животноводство.
Большое значение в связи с интенсификацией животноводства отводится
профилактике инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных с
применением рекомбинантных живых вакцин и генноинженерных вакцин-антигенов, ранней диагностике этих заболеваний с помощью моноклональных антител и
ДНК/РНК-проб.
Для повышения продуктивности животных нужен полноценный корм.
Микробиологическая промышленность выпускает кормовой белок на базе
различных микроорганизмов — бактерий, грибов, дрожжей, водорослей. Богатая белками биомасса одноклеточных
организмов с высокой эффективностью усваивается сельскохозяйственными
животными. Так, 1 т кормовых дрожжей позволяет получить 0,4- 0,6 т свинины, до 1,5 т мяса птиц, 25—30 тыс. яиц и сэкономить 5—7 т зерна (Р. С. Рычков,
1982). Это имеет большое народнохозяйственное значение, поскольку 80%
площадей сельскохозяйственных угодий в мире отводятся для производства
корма скоту и птице.
Одноклеточные организмы характеризуются высоким содержанием белка — от 40
до 80% и более. Белок одноклеточных богат лизином, незаменимой
аминокислотой, определяющей его кормовую ценность. Добавка биомассы
одноклеточных к недостаточным по лизину растительным кормам позволяет
приблизить их аминокислотный состав к оптимальному. Недостатком биомассы
одноклеточных является нехватка серусодержащих аминокислот, в первую
очередь метионина. У одноклеточных его приблизительно вдвое меньше, чем в
рыбной муке. Этот недостаток присущ и таким традиционным белковым кормам, как соевая мука. Питательная ценность биомассы одноклеточных может быть
значительно повышена добавкой синтетического метионина.
Производство кормового белка на основе одноклеточных — процесс, не
требующий посевных площадей, не зависящий от климатических и погодных
условий. Он может быть осуществлен в непрерывном и автоматизированном
режиме.
В нашей стране производится биомасса одноклеточных, в особенности на базе
углеводородного сырья. Достигнутые успехи не должны заслонять проблемы, возникающей при использовании углеводородов как субстратов для
крупномасштабного производства белка, — ограниченность их ресурсов.
Важнейшими альтернативными субстратами служит метанол, этанол, углеводы
растительного происхождения, в перспективе водород.
Очищенный этанол на мировом рынке стоит почти вдвое дороже метанола, но
этанол отличается очень высокой эффективностью биоконверсии. Из 1 кг
этанола можно получить до 880 г дрожжевой массы, а из 1 кг метанола-до 440
г. Биомасса из этанола особенно богата лизином — до 7%.
Большое значение для животноводства имеет обогащение растительных кормов
микробным белком. Для этого широко применяют твердофазные процессы.
Перспективными источниками белка представляются фото-трофные
микроорганизмы, в особенности цианобактерии рода Spirulina и зеленые
одноклеточные водоросли из родов Chlorella и Scenedesmus. Наряду с обычными
аппаратами для их выращивания используют искусственные водоемы. Добавление
к растительным кормам биомассы Scenedesmus позволяет резко повысить
эффективность усвоения белков животными.
Таким образом, существуют разнообразные источники сырья для получения
биомассы одноклеточных. Некоторые субстраты (этанол) дают столь
высококачественный белок, что он может быть рекомендован в пищу.
Цианобактерии рода Spirulina издавна используют в пищу ацтеки в Центральной
Америке и племена, обитающие на озере Чад в Африке.
2. Технологическая биоэнергетика
Технологическая биоэнергетика — одно из направлений биотехнологии, связанное с эффективным использованием энергии, запасаемой при фотосинтезе.
Это может быть достигнуто путем: 1) превращения биомассы, накопленной в
результате фотосинтеза в дешевое и высококалорийное топливо — метан и
другие углеводороды, этанол и т. д.; 2) модификации самого процесса
фотосинтеза, в результате которой энергия света с максимальной
эффективностью используется на образование водорода или другого топлива, минуя стадию фотоассимиляции СО2 и синтеза компонентов клетки. На уровне
теоретических разработок находится идея непосредственного преобразования
энергии Солнца в электрическую (биофотоэлектрические преобразователи
энергии).
Рассмотрим вначале путь, пролегающий через использование биомассы, в первую
очередь, растительной, ресурсы которой в мире огромны и оцениваются в 100
млрд. т по сухому веществу в год. Лишь незначительная часть ее расходуется
человечеством, но и эта часть дает до 14% потребляемой в мире энергии.
Биомасса — не только возобновляемый и почти даровой источник энергии, но и
альтернатива тающим запасам полезных ископаемых.
Получение этанола как топлива.
Этанол — экологически чистое топливо, дающее при сгорании СО2 и Н2О. Он
используется в двигателях внутреннего сгорания в чистом виде или как 10—20%-
ная добавка к бензину (газохол). В Бразилии уже к 1983 г. 75% автомобилей
работали на 95%-ном этаноле, а остальные — на газохоле. В США предполагают
заменить на этанол 10% потребляемого бензина. Широкое внедрение этанола
планируется в странах Западной Европы.
На значительных посевных площадях намечают выращивать сельскохозяйственные
культуры, предназначенные для биотехнологической переработки в этанол. В
условиях дефицита посевных площадей возникает проблема, которая уже в наши
дни актуальна для Бразилии и выражается дилеммой: продовольствие или
энергия. Производство этанола из растительного сырья не является
безотходным: на каждый литр спирта при-
ходится 12—14 л сточных вод с высокой концентрацией отходов, опасных для
природных экосистем. Проблема рациональной переработки этих отходов не
решена.
Классическим биообъектом, используемым при получении спирта, являются
дрожжи Saccharomyces cerevisiae. Дрожжи имеют ряд недостатков.
1. Конкуренция брожения и дыхания. Субстрат (например, глюкоза) лишь
частично сбраживается до этанола. Оставшаяся часть безвозвратно теряется, превращаясь в результате дыхания в СО2 и Н2О. Процесс необходимо вести в
анаэробных условиях или применять мутанты дрожжей, утратившие митохондрии и
не способные к дыханию.
2. Чувствительность к этанолу, которая снижает выход целевого продукта на
единицу объема биореактора. Получены устойчивые к этанолу мутанты, характеризующиеся измененным строением клеточных мембран.
3. Отсутствие ферментов, катализирующих расщепление крахмала, целлюлозы, ксилана. Необходим предварительный гидролиз субстрата или засев биореактора
смешанной культурой, содержащей, помимо S. cerevisiae, микроорганизмы с
соответствующей гидролитической активностью.
Бактерия Zymomonas molilis, применявшаяся центральноамериканскими индейцами
для сбраживания сока агавы, более эффективно сбраживает сахара и более
устойчива к этанолу. Дальнейшее повышение устойчивости Z. mobilis к этанолу
достигается добавлением в среду инкубации Mg2+ и ряда нуклео-тидных
компонентов.
Термофильные бактерии, продуценты этанола характеризуются высокой скоростью
роста и метаболизма, чрезвычайно стабильными ферментами, необычной для
остальных бактерий устойчивостью к этанолу (до 15% и более). Термофилы
способны к биоконверсии полисахаридных субстратов в этанол. Так,
Thermoanaerobium brockii сбраживает крахмал, Clostridium thermocellum —
целлюлозу, Cl. thermohydrosulfuricum утилизирует продукты деградации
целлюлозы с очень высоким выходом спирта. Перспективно применение
экстремально термофильного продуцента спирта Thermoanaerobacter
ethanolicus. Планируют использование также ацидофильных (оптимум рН 1,5) и
галофильных продуцентов спирта.
Повышение выхода спирта и стабилизация активности его продуцентов могут
быть достигнуты путем иммобилизации клеток. Так, эффективный синтез этанола
осуществлен с применением клеток Z. mobilis, иммобилизованных на
хлопчатобумажных волокнах (S. Prentis, 1984).
Получение метана и других углеводородов.
Получение метана — важный путь утилизации сельскохозяйственных отходов. Он
получается в виде биогаза — смеси метана и СО2. Присутствие СО2
ограничивает теплотворную способность биогаза как топлива, которая в
зависимости от соотношения СН4/СО2 составляет 20,9—33,4 кДж/м3. Содержание
метана в биогазе варьирует от 50 до 85%.
Непосредственно к образованию метана способна небольшая группа
микроорганизмов, относящихся к архебактериям. Жизнедеятельность
метанобразующих архебактерий протекает в строго анаэробных условиях.
Субстратами для образования метана могут служить муравьиная и уксусная
кислоты, метанол, газовые смеси (Н2 + СО, Н2 + СО2). Поскольку биогаз
практически получают из сложных органических веществ (целлюлозы, крахмала, белков, липидов, нуклеиновых кислот), то для метан-образования применяют
многокомпонентные микробные ассоциации.
Наряду с метанобразующими бактериями в состав таких ассоциаций входят
микроорганизмы, переводящие органические субстраты в метанол, муравьиную и
уксусную кислоты, Н2, СО и т. д. Примером может служить метаногенная
ассоциация «Methanobacillus Kuzneceovii», образующая метан при разложении
биомассы водорослей (Чан Динь Тоай, 1984).
Процесс метанобразования отличается высокой эффективностью: до 90—95%
используемого углерода переходит в метан. Поэтому метаногенные ассоциации с
успехом используют для очистки сточных вод от органических загрязнений с
одновременным получением высококалорийного топлива. До 5—10% потребленного
углерода превращается в биомассу, которая также находит применение.
Используют как жидко-, так и твердофазные процессы получения биогаза
(биогазификации).
Наряду с биогазом метаногенные ассоциации образуют другие ценные продукты, например витамин В12 После переработки органического субстрата в биогаз
остается материал, представляющий собой ценное минеральное (азотное и
фосфорное) удобрение.
Получение биогаза — процесс, отличающийся простотой оборудования и
доступностью сырья, требует небольших капиталовложений. В Китае, Индии, ряде других стран эксплуатируются небольшие установки, в которые вносят
подручный материал (солому, навоз и др.), что исключает затраты на доставку
сырья. В Китае действует свыше 7 млн. малых установок вместимостью 10—15 л, достаточных для удовлетворения энергетических потребностей семьи из пяти
человек.
Кроме метаногенных анаэробов существует другая группа организмов —
продуцентов углеводородов как заменителей топлива. Это микроводоросли —
Botryacoceus, Isochrysis, Nanochlo-ropsis и др. Углеводороды накапливаются
в значительных количествах — до 80% сухой массы клеток. В США действует
ферма для выращивания водорослей с суммарной площадью водоемов 52 тыс.
гектаров, дающая около 4800 м3 жидких углеводородов в сутки. Для улучшения
топливных характеристик полученные из водорослей углеводороды подвергают
гидрированию (Г Н Чернов, 1982).
Получение водорода как топлива будущего.
Получение водорода как топлива пока остается на уровне поисковых
разработок. Это абсолютно чистое топливо, дающее при сгорании лишь Н2О, отличается исключительно высокой теплотворной способностью — 143 кДж/г.
Химический и электрохимический способы получения Н2 неэкономичны, поэтому
заманчиво использование микроорганизмов, способных выделять водород. Такой
способностью обладают аэробные и анаэробные хемотрофные бактерии, пурпурные
и зеленые фототрофные бактерии, цианобактерии, различные водоросли и
некоторые простейшие (Е. Н. Кондратьева, И. Н. Го-готов, 1981). Процесс
протекает с участием гидрогеназы или нитрогеназы.
Гидрогеназа — фермент, содержащий FeS-центры. Она катализирует реакцию
2Н+ + 2е- = Н2
Одна из технологических возможностей основана на включении изолированной
гидрогеназы в состав искусственных Н2-генерирую-щих систем. Сложной
проблемой является нестабильность изолированного фермента и быстрое
ингибирование его активности водородом (продуктом реакции) и кислородом.
Повышение стабильности гидрогеназы может быть достигнуто ее иммобилизацией
(Чан Динь Тоай, 1984; Y. Nosaka et. al., 1986). Иммобилизация предотвращает
ингибирование гидрогеназы кислородом.
Предложено много вариантов модельных систем, катализирующих образование
водорода из воды за счет энергии света. Эти системы различаются механизмом
улавливания энергии света и содержат хлоропласты или изолированный из них
хлорофилл, а также восстановленные никотинамидные нуклеотиды. Некоторые
системы наряду с водородом образуют кислород: в этом случае речь идет о
биофотолизе воды.
Примером может служить система хлоропласт — ферредоксин — гидрогеназа.
Ферредоксин служит промежуточным переносчиком электронов от
фотосинтетической цепи хлоропластов к добавленной гидрогеназе. Серьезной
проблемой является поддержание низкого парциального давления этих газов, с
тем чтобы не наступило ингибирование гидрогеназы. При замене ферредоксина
на флавопротеид или метилвиологен система образует только Н2. Флавопротеид
и, по некоторым данным, метилвиологен защищают гидрогеназу от ингибирования
кислородом. Разрабатываются системы с изолированным хлорофиллом, встроенным
в детергент ные мицеллы или липосомы вместе с гидрогеназой. Предложена
также система с гидрогеназой, иммобилизованной в агарозном геле, с которым
прочно связан полимерный виологен и металлопорфирин, аналог хлорофилла.
Водород получают также с применением целых клеток микроорганизмов, стабильность которых возрастает при их иммобилизации. Высокоэффективными
продуцентами Н2 являются пурпурные фототрофные бактерии, например
Rhodopseudomonas sp., которые при иммобилизации в агарозном геле дают до
180 мкмоль Н2 за 1 ч в пересчете на 1 мг бактериохлорофилла (М. Tadashi, A.
Akira, 1983). Важное направление работ — поиск продуцентов Н2 с устойчивой
к О2 гидрогеназой.
Другим ферментом, катализирующим выделение водорода, является нитрогеназа.
У всех микроорганизмов нитрогеназа состоит из двух, компонентов, а именно
из MoFeS-протеида (молибдоферредоксина) и FeS-протеида (азоферредоксина).
Основной функцией нитрогеназы является восстановление молекулярного азота:
N2 + 8H+ + 8е- + nАТФ -> 2NH3 + Н2 + nАДФ + nфосфорная кислота
В отсутствие основного субстрата (N2) нитрогеназа катализирует
энергозависимое
восстановление Н+ с образованием Н2. Переключение фермента с одного режима
работы на другой является технологической проблемой. Один из путей решения
— получение штаммов микроорганизмов с нитрогеназой, не утилизирующей азот.
В Японии получен штамм Anabaena sp., который осуществляет биофотолиз воды в
режиме, не чувствительном к Н2, О2 и N2. Повышению эффективности
биофотолиза воды способствует чередование периодов функционирования
биообъекта как продуцента Н2 и О2 с периодами «отдыха», когда клетки
фотоассими-лируют СО2 (вводимый на этот период в среду культивирования).
Возможно комбинирование процессов получения Н2 и других ценных продуктов. В
частности, представители рода Clostridium дают органические растворители и
в то же время обладают активной гидрогеназой. Если в реакторе с культурой
Cl. saccharo-perbutylacetoniocum не создавать оттока для выделяющегося Н2, то наблюдается ингибирование образования Н2 и эффективный синтез бутанола, ацетона и этанола. Если водороду обеспечивают свободный отток, то наряду с
довольно активным образованием Н2 культура синтезирует лишь этанол. Этот
пример иллюстрирует возможность управления ходом биотехнологического
процесса условиями культивирования биообъекта.
Таким образом, предложены разнообразные проекты систем для получения
водорода с использованием биообъектов. Речь идет о вмешательстве человека в
процесс биоконверсии энергии с целью добиться ее возможно более полного
превращения в энергию химической связи в молекуле Н2.
Пути повышения эффективности фотосинтетических систем.
Рассчитанная теоретически эффективность фотосинтеза, т. е. коэффициент
превращения световой энергии в химическую энергию органических веществ, близка к 15%. Фактически, однако, наиболее продуктивные культурные растения
запасают не более 1,5—2% энергии падающего света. Актуальная проблема
технологической биоэнергетики — повышение эффективности фотосинтеза у
культурных растений.
Разрабатывают следующие основные подходы к решению этой проблемы: 1)
повышение коэффициента превращения солнечной энергии до 4—5% за счет
увеличения площади листьев и их раннего формирования; 2) вмешательство в
системы регуляции фотосинтеза — сбалансированное использование
фитогормонов, трансплантация регуляторных генов; 3) увеличение скорости
роста растений за счет оптимизации водного и минерального питания, что
приведет к повышению их фотосинтетической активности; 4) увеличение числа
хлоропластов в клетке на единицу площади листа; 5) установление
оптимального соотношения между функционирующими реакционными центрами
хлорофилла и промежуточными переносчиками электронов, например, цитохромами; 6) увеличение скорости переноса электронов между фотосистемами
I и II и эффективности сопряжения между транспортом электронов и синтезом
АТФ.
Радикальным способом максимизации эффективности фотосинтеза было бы
создание искусственных фотосистем, имитирующих основные блоки
фотосинтетического аппарата живых организмов, но внедрение подобных
преобразователей энергии, по-видимому, отделено от нас несколькими
десятилетиями.
Биотопливные элементы.
На уровне поисковых разработок находятся биотоплйвные элементы, превращающие химическую энергию субстрата в электрическую. Примерами могут
служить топливные элементы на основе окисления метанола в муравьиную
кислоту с участием алкогольдегидрогеназы, муравьиной кислоты в CU2 с
участием формиатдегидрогеназы, глюкозы в глюконовую кислоту с участием
глюкозооксидазы. Используют также катали -тическую активность целых клеток, например Е. coli, Вас. subtilis, Ps. aeruginosa, в реакции окисления
глюкозы.
Окисление субстрата происходит на электроде (аноде). Посредником между
субстратом и анодом является биокатализатор. Существуют два пути дальнейшей
передачи электронов на
электрод: 1) с участием медиатора и 2) непосредственный транспорт
электронов на электрод (А. И. Ярополов, И. В. Березин, 1985). Конструкция
биотопливного элемента позволяет генерировать не только электрический ток, но и осуществлять важные химические превращения. Например, топливный
элемент с глюкозооксида-зой и p-D-фруктофуранидазой переводит сахарозу в
смесь фруктозы и глюконовой кислоты.
Ферментные электроды применяются не только в топливных элементах. Они
представляют собой основной компонент биологических датчиков — биосенсоров, широко применяемых в химиче-
ской промышленности, медицине, при контроле за биотехнологическими
процессами, в аналитических целях и т. д. Обычно используют системы с
биокатализатором, иммобилизованным на поверхности мембранного электрода.
Например, иммобилизацией пенициллиназы на обычном рН-электроде получают
чувствительный биосенсор, регистрирующий концентрацию пенициллина.
Иммобилизация клеток Е. coli на кислородном электроде дает биосенсор для
измерения концентрации глутаминовой кислоты, а иммобилизация клеток Nitro-
somonas sp. и Nitrobacter sp. на том же электроде — биосенсор на NH4+. На
биосенсоре протекают следующие превращения: NH4+Nitrosomonas NO2
Nitrobacter NO3 Разработаны биосенсоры для быстрой регистрации концентрации
глюкозы в крови больного, что особенно важно при диагностике диабета.
Рекомендуем скачать другие рефераты по теме: контрольная 6 класс, русские шпоры.
Предыдущая страница реферата | 1 2 3 4 | Следующая страница реферата